1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现，1986年Johnstone将其命名为“exosome”，即外泌体。人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体，外泌体广泛存在于各种体液中，携带多种蛋白质、mRNA、miRNA和脂质类物质等，作为重要的传递信号分子，形成了一种全新的细胞-细胞间信息传递系统，可参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。

一、什么是外泌体？

外泌体是由多泡体（multive bodies,MVB）与胞膜融合后分泌到细胞外环境中的，粒径介于30-150nm的膜性小囊泡，是细胞间信息传递的重要载体。天然存在于各种体液中，包括血液、唾液、尿液、母乳及胸腹水等。

二、外泌体从哪来？到哪去？

外泌体的生成：

1. 各种体细胞通过内吞作用产生内吞囊泡，

2. 内吞囊泡融合形成早期核内体（early endosome），并逐渐变为晚期核内体（late endosome）。

3. 随着胞质内核酸和蛋白等一些“货物”的进入，晚期核内体会产生很多内腔囊泡（intraluminal vesicles，ILVs），并逐渐演变成多泡体（multivesicular body，MVB）；

4. 内腔囊泡被释放到胞外，形成外泌体。

（Rong Xu et al. J Clin Invest. 2016）

外泌体的作用机制：

a）外泌体进入受体细胞后，将“货物”释放进入胞质内，并重新形成多泡体；

b）外泌体将“货物”释放进入胞质，但自身与细胞质膜融合；

c） 外泌体上的配体与受体细胞膜上特殊受体结合，既能起到信号传导作用，也能通过内吞作用，将“货物”运入胞内。

三、外泌体怎么分离出来？

目前，外泌体的分离多采用超速离心、尺寸排阻色谱，磁珠免疫捕获、沉淀或过滤等方法。

（Marta Monguió‑Tortajada et al. Cell Mol Life Sci. 2019）

各分离方法优缺点

四、如何鉴定外泌体？

MISEV2018对外泌体的表征规定了最小试验要求：

① 总体表征：Western blot或流式细胞术

至少3个阳性（至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白）、1个阴性蛋白质标志物。

② 个体表征：纳米颗粒追踪分析（NTA）和电镜表征（TEM）

电镜或原子力显微镜、单颗粒追踪两种方法互为补充。

五、外泌体能做什么？

六、外泌体研究思路？

七、外泌体研究方案？